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【转】Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜?

2011-7-27 13:57:15 阅读57 评论0 272011/07 July27

转自:http://lunar0sea.blog.163.com/blog/static/358234002009915112422346/

 

Western Blot时最常用的两种膜是硝酸纤维素膜(nitrocellulose,NC膜)和PVDF膜(又称Positively charged nylon)(Polyvinylidene fluoride,聚偏二氟乙烯膜)。

这两种膜各自有什么特点?我们的实验中该选择哪一种呢?来看下面的文字。(摘自《

作者  | 2011-7-27 13:57:15 | 阅读(57) |评论(0) | 阅读全文>>

【摘录】Realtime相关摘录备用

2011-4-14 20:32:54 阅读87 评论0 142011/04 Apr14

   做绝对定量PCR实验,一定而且必须要有标准品,通过稀释标准品制做标准曲线,对待测样品进行定量。因为制做已知拷倍数的标准很困难,而且得到的结果不一定准确。所以目前大部分人都是做相对定量PCR.
 

作者  | 2011-4-14 20:32:54 | 阅读(87) |评论(0) | 阅读全文>>

western blot相关综合转——抗体选择

2010-12-10 8:29:33 阅读377 评论0 102010/12 Dec10

如何选择合适的一抗?
请先确定您检测样品的种属,然后查找相关产品,根据说明书上描述的;适用种属和实验方法;来确定合适的抗体。如果说明书中有明确您要检测的种属和实验方法均经过检测,则您可以放心地购买该产品。如果说明书中没有注明您用的种属和实验方法经过验证,则要仔细考虑是否购买。
如何选择合适的二抗?
针对一抗来源的二抗(比如一抗是小鼠来源的,二抗就要是抗小鼠的)
针对一抗Ig亚型的(比如一抗是IgM,二抗就要是抗IgM的抗体)
根据你实验的需要,选择二抗的标记类型。
也可以通过一抗说明书页面的Related Products;来选择合适的二抗

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作者  | 2010-12-10 8:29:33 | 阅读(377) |评论(0) | 阅读全文>>

Bios开机自检响声的含义

2010-12-10 8:20:44 阅读81 评论0 102010/12 Dec10

主板报警声音详解 1)AWARD的BIOS设定为: 长声不断响:内存条未插紧。 2短:系统正常启动。 2短:CMOS设置错误,需重新设置。 1长1短:内存或主板错误。 1长2短:显示器或显卡错误。 1长3短:键盘控制器错误。 1长9短:主板BIOS的FLASH RAM或EPROM错误。 2)AMI的BIOS设定为: 1短:内存刷新故障。 2短:内存ECC校验错误。 3短:系统基本内存检查失败。 4短:系统时钟出错。 5短:CPU出现错误。 6短:键盘控制器错误。 7短:系统实模式错误。 8短:显示内存错误。 9短:BIOS芯片检验错误。 1长3短:内存错误。 1长8短:显示器数据线或显卡未插好。 3)Phoenix的BIOS自检响铃及其意义 1短 系统启动正常 1短1短1短:系统加电初始化失败 1短1短2短:主板错误 1短1短3短:CMOS或电池失效 1短1短4短:ROM BIOS校验错误 1短2短1短:系统时钟错误

作者  | 2010-12-10 8:20:44 | 阅读(81) |评论(0) | 阅读全文>>

【转】聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)专题

2010-11-22 20:14:29 阅读99 评论0 222010/11 Nov22

PCR、分子克隆和DNA序列分析这三位一体的实验方法几乎构成了整个现代分子生物学的实验工作的基础。
一、PCR的七种基本成分
1.热稳定的DNA聚合酶:催化模板依赖的DNA合成。(决定因素:合成大片段DNA产物的高保真度、效率及合成能力)

本实验室在做PCR时,主要用到三种聚合酶:(1)Taq酶:一般用于做预试验或是鉴定实验。扩增速度为1000bp/min。易错配。Taq DNA聚合酶的N端3’-5’外切核酸酶亚结构域中所有必需的金属结合位点都已通过突变没消除。由于缺乏校正功能,有较高的d NTP错误掺入率。(Taq酶贮存于含有5%甘油贮存缓冲液中供应)(2)Pfu:500bp/min,高保真的酶,一般用于扩增1500bp以下的基因。(3)prime star

作者  | 2010-11-22 20:14:29 | 阅读(99) |评论(0) | 阅读全文>>

【转】PCR之歌

2010-9-22 16:01:35 阅读40 评论0 222010/09 Sept22

都听同学提起很久了,今天终于找来听了,真的太强大了,这个广告......
 
请点击查看影音文件...

作者  | 2010-9-22 16:01:35 | 阅读(40) |评论(0) | 阅读全文>>

【截选】《道德经》第三十六章

2010-9-7 21:58:11 阅读23 评论0 72010/09 Sept7


将欲歙之,必固张之;

将欲弱之,必固强之;

将欲废之,必固兴之;

将欲取之,必固与之。

是谓微明,柔弱胜刚强。

鱼不可脱于渊,国之利器不可以示人。

作者  | 2010-9-7 21:58:11 | 阅读(23) |评论(0) | 阅读全文>>

一封员工要求加薪的英文信,以及老板的回信【转】

2010-6-25 13:38:19 阅读55 评论1 252010/06 June25

这个真是太有才了,不得不转~~~

 

Dear Bo$$
In thi$ life, we all need $ome thing mo$t de$perately. I think you $hould be under$tanding of the need$ of u$ . worker$ who have given $o much $upport including $

作者  | 2010-6-25 13:38:19 | 阅读(55) |评论(1) | 阅读全文>>

搞笑图一张

2010-5-10 15:01:00 阅读52 评论0 102010/05 May10

    今天无意间在群的相册里看到这张截图,实在太搞笑了,也不知是不是真的,转帖过来,大家一起笑一下。
 
搞笑图一张 - St.Cecilia - Med-Student
 
 

作者  | 2010-5-10 15:01:00 | 阅读(52) |评论(0) | 阅读全文>>

浓缩DNA的方法

2010-4-13 20:37:28 阅读517 评论0 132010/04 Apr13

如果DNA 纯度低、浓度也不高的话:
1、将抽提好的DNA用水或者TE补加至400ul,然后加同等体积的Tris饱和酚抽提两次;氯仿抽提一次;
2、吸上清,加1/10体积的1M NaCl,2.5倍体积的无水乙醇,-20°C放置20分钟;
3、12000rpm离心10分钟,弃上清;
4、加800ul 75%酒精,离心洗涤5分钟;
4、弃上清,室温干燥10~15分钟,然后加入适当体积的水或者TE溶解DNA。

(转自丁香园)

作者  | 2010-4-13 20:37:28 | 阅读(517) |评论(0) | 阅读全文>>

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